本發明涉及微生物轉化領域，公開了一種3-表酯蟾毒配基的制備方法，包括將含大鼠腸道菌群的懸浮液在GAM培養液中37℃厭氧培養22～25h，向所得培養液中加入酯蟾毒配基，37℃厭氧培養40～80h，酯蟾毒配基的加入量為每1mL培養液加入0.1～0.3mg酯蟾毒配基，取培養液以非極性溶劑萃取，收集萃取液，得3-表酯蟾毒配基。本發明利用大鼠腸道菌群轉化酯蟾毒配基制備3-表酯蟾毒配基，方法簡單，制備過程中產生的副產物少，酯蟾毒配基轉化率高，制備的3-表酯蟾毒配基純度高，可用于3-表酯蟾毒配基的大量制備。
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